地佐辛对成骨细胞MC3T3-E1增殖、分化及对Wnt/β-catenin信号通路的影响

目的：探讨地佐辛对成骨细胞MC3T3-E1增殖、分化及对Wnt/β-catenin信号通路的影响。方法：使用质量浓度为0、5、10、20、40和80μg/mL的地佐辛处理MC3T3-E1细胞48 h后，采用细胞计数试剂盒-8（CCK-8）检测细胞存活率，计算半数抑制浓度(IC50)。将MC3T3-E1细胞分为对照组、地佐辛低浓度组（10μg/mL）、地佐辛中浓度组（20μg/mL）、地佐辛高浓度组（40μg/mL）和地佐辛高浓度+氯化锂（LiCl）组（40μg/mL+20μmol/L）,采用CCK-8检测细胞存活率；碱性磷酸酶（ALP）检测试剂盒检测细胞ALP活性；茜素红染色检测细胞钙化结节；蛋白质印迹法检测细胞中成骨分化相关蛋白[Runt相关转录因子2（RUNX2）、骨桥蛋白（OPN）和骨钙素（OCN）]及Wnt/β-catenin信号通路蛋白（Wnt3a、β-catenin）表达水平。结果：MC3T3-E1细胞对地佐辛的IC50约为20μg/mL;与对照组比较，地佐辛低、中及高浓度组细胞存活率、ALP活性和钙化结节数目，RUNX2、OPN、OCN、Wnt3a和β-catenin蛋白表达水平依次降低，差异均有统计学意义（P<0.05）;与地佐辛高浓度组比较，地佐辛高浓度+LiCl组细胞存活率、ALP活性和钙化结节数目，RUNX2、OPN、OCN、Wnt3a和β-catenin蛋白表达水平明显升高，差异均有统计学意义（P<0.05）。结论：地佐辛可通过抑制Wnt/β-catenin信号通路来抑制成骨细胞MC3T3-E1的增殖、分化。