淫羊藿苷通过提高自噬促进成骨细胞分化防治骨质疏松

背景:淫羊藿苷是用于防治骨质疏松疗效比较确切的中药活性成分,但其具体的机制尚未完全明确。研究表明自噬能够参与调控骨代谢,淫羊藿苷是否能够通过改变自噬防治骨质疏松尚未可知。目的:研究淫羊藿苷是否通过调节自噬促进成骨细胞分化防治骨质疏松。方法:①体外实验:选取对数生长期小鼠前体成骨细胞株（MC3T3-E1）,用不同浓度的淫羊藿苷(10-6-10-3mmol/L)干预,通过观察细胞活力、细胞凋亡率、碱性磷酸酶活性、矿化结节数量、成骨分化标志物表达水平确定淫羊藿苷的最佳作用浓度;用最佳浓度淫羊藿苷处理MC3T3-E1细胞,将细胞分为3组:对照组、淫羊藿苷组及淫羊藿苷+3-MA组（自噬抑制剂）,MDC染色检测自噬体数量,实时荧光定量聚合酶链反应检测成骨分化标志物及自噬相关基因的表达水平,免疫印迹法检测自噬相关蛋白的表达水平;②体内实验:通过构建去势大鼠模型,将动物分为4组:假手术组、病理模型组、淫羊藿苷组、戊酸雌二醇组,显微CT检测各组骨显微参数,免疫印迹法检测各组自噬相关蛋白表达水平。结果与结论:①淫羊藿苷能促进成骨细胞的增殖以及分化,同时抑制细胞凋亡,以10-5 mmol/L淫羊藿苷能力最强（P <0.05）;②淫羊藿苷能够增加自噬体的数量,同时可上调成骨分化标志物及自噬相关基因、蛋白的表达（P <0.05）,3-MA能够拮抗这些效应（P <0.05）;③淫羊藿苷能够改善去势大鼠骨微结构相关参数,同时上调自噬相关蛋白的表达（P <0.05）;④结果提示,淫羊藿苷能够通过提高自噬促进成骨细胞分化防治骨质疏松。