根癌农杆菌对甘蓝型油菜的转化及转基因植株的再生

被引：98

作者：

程振东

卫志明

许智宏

机构：

[1] 中国科学院上海植物生理研究所植物分子遗传国家重点实验室!上海

来源：

植物学报 | 1994年 / 09期

关键词：

甘蓝型油菜; 根癌农杆菌; 转基因植株;

D O I：

暂无

中图分类号：

Q943.1 [植物细胞的离体培养];

学科分类号：

摘要：

用根癌农杆菌（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｔｕｍｅｆａｃｉｅｎｓ）共培养法把外源基因导入甘蓝型油菜（Ｂｒａｓｓｉ－ｃａｎａｐｕｓＬ．）主要栽培品种“云北２号”，获得转基因植株。所用外植体为带有１—２ｍｍ子叶柄的完整子叶，根癌农杆菌为Ａ２０８ＳＥ（ｐＴｉＴ３７－ＳＥ，ｐＲＯＡ９３）。Ｔｉ质粒ｐＲＯＡ９３带有ＮＰＴⅡ及ＧＵＳ嵌合基因。共培养２天后转到附加２５ｍｇ／Ｌ卡那霉素的分化培养基（ＭＳ＋４．５ｍｇ／ＬＢＡＰ）上。ＡｇＮＯ３和羧苄青霉素促进芽的分化，头孢霉素则有抑制作用。最高转化频率为２７％。把分化出的茎芽切下，插入含有２５ｍｇ／Ｌ卡那霉素的生根培养基中。羧苄青霉素不利于根的形成。把完整抗性植株移入盛土壤的盆中，生长状况良好。测定β－葡糖苷酸酶活性，８４％明显高于对照。以ＮＰＴⅡ基因作探针进行Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ分析，证实外源基因已插入到植物细胞基因组中

引用

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