根癌农杆菌对甘蓝型油菜的转化及转基因植株的再生

被引：98
|
作者：
程振东
卫志明
许智宏
机构：
[1] 中国科学院上海植物生理研究所植物分子遗传国家重点实验室!上海
来源：
植物学报 | 1994年 / 09期
关键词：
甘蓝型油菜; 根癌农杆菌; 转基因植株;
D O I：
暂无
中图分类号：
Q943.1 [植物细胞的离体培养];
学科分类号：
摘要：
用根癌农杆菌（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｍ ｅｆａｃｉｅｎｓ）共培养法把外源基因导入甘蓝型油菜（Ｂｒａｓｓｉ－ｃａ ｎａｐｕｓＬ．）主要栽培品种“云北２ 号”，获得转基因植株。所用外植体为带有１—２ ｍ ｍ 子叶柄的完整子叶，根癌农杆菌为Ａ２０８ＳＥ（ｐＴｉＴ３７－ＳＥ， ｐＲＯＡ９３）。Ｔｉ质粒ｐＲＯＡ９３ 带有ＮＰＴⅡ及ＧＵＳ嵌合基因。共培养２ 天后转到附加２５ ｍ ｇ／Ｌ卡那霉素的分化培养基（ＭＳ＋ ４．５ ｍ ｇ／ＬＢＡＰ）上。ＡｇＮＯ３ 和羧苄青霉素促进芽的分化，头孢霉素则有抑制作用。最高转化频率为２７％ 。把分化出的茎芽切下，插入含有２５ ｍ ｇ／Ｌ卡那霉素的生根培养基中。羧苄青霉素不利于根的形成。把完整抗性植株移入盛土壤的盆中，生长状况良好。测定β－葡糖苷酸酶活性，８４％ 明显高于对照。以ＮＰＴⅡ基因作探针进行Ｓｏｕｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ分析，证实外源基因已插入到植物细胞基因组中
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页码：657 / 663+737 +737
页数：8
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