目的 通过体外研究，探讨加味补阳还五汤抑制的腹膜间皮细胞(PMC)上皮-间充质转化(EMT)防治术后腹腔粘连(PAA)的作用，是否主要通过促进大网膜脂肪干细胞(ADSCs)旁分泌肝细胞生长因子(HGF)。方法 实验1明确加味补阳还五汤抑制PMC的EMT作用，是该方对PMC的直接作用，还是通过调控大网膜中的ADSCs旁分泌的间接作用：使用加味补阳还五汤与加味补阳还五汤培养ADSCs后制取其条件培养基(以下称“中药培养基”)分别干预EMT模型的PMC,Western Blot法检测EMT相关的蛋白E-钙黏蛋白(E-Cad)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达水平。实验2明确加味补阳还五汤抑制PMC的EMT作用，是否与大网膜中的ADSCs旁分泌HGF相关：用低表达HGF的ADSCs条件培养基(以下称“低HGF培养基”)、正常ADSCs条件培养基(以下称“普通培养基”)、中药培养基等3种培养基干预PMC,并检测以下指标：(1)用ELISA法检测在干预PMC之前和之后，3种培养基中HGF的含量。(2)Western Blot法、qPCR法、免疫荧光(IF)法检测干预后各组PMC的EMT相关蛋白表达水平，划痕实验检测各组PMC的迁移能力。结果 实验1:加味补阳还五汤与中药培养基对EMT相关指标的影响。与模型组相比，加味补阳还五汤组上调E-Cad的蛋白表达(P<0.05),下调α-SMA的蛋白表达(P<0.05);中药培养基组显著上调了E-Cad的蛋白表达(P<0.01),显著下调α-SMA的蛋白表达(P<0.01)。与加味补阳还五汤组相比，中药培养基组上调E-Cad的蛋白表达(P<0.05),显著下调α-SMA的蛋白表达(P<0.01)。实验2:(1)作用于PMC前后，3种不同的培养基中HGF含量的比较：作用于PMC前，相比于普通培养基，低HGF培养基中含量显著降低(P<0.01),中药培养基中含量显著增加(P<0.01);作用于PMC后，各培养基组含量均显著性下降。(2)EMT相关蛋白表达情况：综合Western Blot、qPCR、IF结果，与模型组相比，各培养基组均可升高E-Cad表达(P<0.05或P<0.01),降低α-SMA、VIM表达(P<0.05或P<0.01),各培养基组均可抑制PMC的EMT,效果依次为中药培养基组>普通培养基组>低HGF培养基组。(3)发生EMT的细胞迁移能力变化情况：干预24、48 h后，与模型组相比，各组愈合率均有显著下降(P<0.01),各组培养基均可降低EMT模型的R的迁移能力，效果依次为中药培养基组>普通培养基组>低HGF培养基组。(4)EMT相关蛋白表达与HGF含量相关性分析：E-Cad蛋白表达量与HGF含量呈正相关性(P<0.05),α-SMA、VIM蛋白表达量与HGF含量呈负相关性(P<0.05或P<0.01)。结论 加味补阳还五汤抑制PMC的EMT防治PAA的疗效可能是多靶点的，既有对PMC的直接作用，也有通过增强大网膜中的ADSCs旁分泌HGF的间接作用，而后者更为主要。
