荧光定量 PCR 检测原料乳中鲁氏不动杆菌方法的建立

为建立鲁氏不动杆菌（Acinetobacter lwoffii）的快速检测方法,本研究以A.lwoffii中的β-内酰胺酶基因(ALblaOXA-134)为目的基因设计特异性引物,建立了SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测A.lwoffii的方法。结果显示,该方法可快速检测A.lwoffii的存在,检测灵敏度为2.4×10～2cfu/m L,建立的标准曲线为y=-3.838x+40.93,相关系数为0.993。与其他原料乳中常见的微生物均未发现交叉反应。人工阳性样品乳中A.lwoffii的检测限为2.4×10～3cfu/m L。最后,对2015年11月至2016年1月长江下游地区8个牧场的原料乳进行监测。结果表明该检测方法具有较好的敏感性、特异性和实用性,为快速检测原料乳中的A.lwoffii提供了有力的技术支撑,有利于保障原料乳的质量安全。