人脐血CD133+和CD133-细胞分化为内皮细胞的实验研究

目的:从人脐血中分离鉴定、培养和诱导分化人脐血CD133+细胞和CD133-细胞,建立一种能够方便获得高纯度人脐血CD133细胞的方法,同时在体外诱导该细胞向内皮细胞分化,进一步明确CD133+细胞与CD133-细胞之间的关系。方法:从新鲜脐血中纯化的CD133+和CD133-接种于添加了干细胞因子(stemcellfactor,SCF),IL-3,IL-6的Sigma无血清培养液中,检测CD133+细胞抗原标志,观察梭形贴壁细胞的出现时间和特异性细胞标志。结果:免疫磁珠法分离的CD133+细胞数为(6.08～6.80)×105,CD133+细胞的纯度96.18±1.83)%。CD133-细胞0.02±0.01)%。培((养3～5d可观察到梭形贴壁细胞,15d左右可形成索条状结构,贴壁细胞表达血管内皮细胞特异性标志血管内皮钙黏蛋白,血浆血管性假性血友病因子(vonWillebrandfactor,vWF),UEA-1和血管内皮生长因子受体2(vascularendothelialgrowthfactorreceptor-2,VEGFR-2)。结论:采用先用密度梯度离心法离心后再用免疫磁珠分选的方法来分离CD133+细胞和CD133-细胞,分离到的细胞纯度高,在一定的条件下,可分化为内皮样细胞。