miR-34a通过下调SIRT1抑制乳腺癌干细胞机制研究

目的:探讨miR-34a通过下调SIRT1抑制乳腺癌干细胞的机制。方法:使用化学合成的方法合成出miR-34a的mimics或者inhibitors,将其感染乳腺癌MCF-7细胞,通过qRT-PCR的方法验证miR-34a的基因表达。以慢病毒作为载体过表达miR-34a的基因,将能够稳定感染的细胞株筛选出来。设计SIRI1基因中的shRNA,用于干扰乳腺癌MCF-7细胞中的SIRT1的表达。使用qRT-PCR方法和Western blotting技术检测SIRT1中mRNA和蛋白的表达。结果:通过miR-34a的mimics转染的细胞的miR-34a的基因表达水平大于没有转染的细胞,通过miR-34a的inhibitors转染的细胞的miR-34a的基因的表达水平小于没有转染的细胞,差异具有统计学意义(P<0.05)。LV-miR-34a感染细胞可以上调miR-34a的表达,与没有转染的细胞相比,差异具有统计学意义(P<0.05)。shRNA-SIRT1-3组和shRNA-SIRT1-4组中的SIRT1中的mRNA和蛋白的表达出现下降的情况。过表达的miR-34a对SIRT1中的mRNA的表达没有影响。miR-34a的mimics具有抑制SIRT1的蛋白表达的作用,miR-34a的inhibitors具有上调SIRT1的蛋白表达的作用,与没有转染的乳腺癌的MCF-7的细胞相比,差别具有统计学意义(P<0.05)。结论:使用miR-34a的模拟物以及抑制物可以调节miR-34a的表达,从而改变SIRT1的蛋白质的表达。